如何降低植物体内可溶性蛋白含量

 行业动态     |      2020-02-22

  植物体内可溶性糖和可溶性卵白含量的测定 摘要: 宗旨 通过法式弧线的绘造, 测定白菜、 芹菜、 菠菜中可溶性卵白和可溶性糖的含量, 分解可溶性糖和可溶性卵白的测定手段。 手段 区分用蒽酮法和考马斯亮蓝染色法来测定植 物体内可溶性糖和可溶性卵白的含量。结论 症结词:白菜;芹菜;菠菜;可溶性卵白含量;可溶性糖含量;蒽酮法;考马斯亮蓝染色法 1 序文 植物体内的可溶性糖和可溶性卵白含量是主要的心理生化目标。 正在作物的碳素养分中, 动作养分物质重要是指可溶性糖和淀粉。 它们正在养分中的用意主 要有:合成纤维素构成细胞壁;转化并构成其他有机物如核苷酸、核酸等;剖判产品是其他 很多有机物合成的原料, 如糖正在呼吸进程中变成的有机酸, 可动作 NH 3 的受体而转化为氨 基酸;糖类动作呼吸基质,为作物的各类合成进程和各类人命运动供给了所需的能量。因为 碳水化合物拥有这些主要的用意,于是是养分中最基础的物质,也是需求量最多的一类。 可溶性卵白是植物体内氮素存正在的重要办法, 其含量的多少与植物的代谢和衰老有亲热 的合联,同时它与植物体支撑渗出压抗脱水也有很大合联。 白菜是十字花科芸薹属叶用蔬菜,滋味鲜美美味,养分厚实,素有“菜中之王” 的美称, 为巨大大多所亲爱。芹菜属伞形科植物, 富含卵白质、碳水化合物、胡萝卜素、B 族维生 素、钙、磷、铁、钠等,同时,拥有有平肝清热,祛风利湿,清肠利便、润肺止咳、下降血 压、健脑从容的效用。菠菜藜科一年生草本植物,三分pk拾走势菠菜含有厚实的维他命 A、维他命 C 及 矿物质,它对各类血亏症和糖尿病、肺结核、高血压、风火赤眼等诸多疾病可起辅帮诊疗作 用。 2 资料与手段 2.1 植物体内可溶性糖含量的测定 2.1.1 资料 别致的白菜、芹菜、菠菜叶片(剪碎后各取 0.5—1.0g) 2.1.2 试剂 葡萄糖法式溶液(200ug/ml)、蒽酮试剂 2.1.3 仪器设置 分光光度计;领会天平;恒温水浴;试管;三角瓶;移液管;铰剪;玻璃棒;滤纸;研 钵 2.1.4 测定手段 样品中可溶性糖的提取: 称取剪碎混匀的别致样品 0.5 ~1.0 g(或干样粉 5~100 mg ) , 放入大试管中,插足 15 ml 蒸馏水,正在开水浴中煮沸 20 min,取出冷却,过滤入 100 ml 容 量瓶中,用蒸馏水冲刷残渣数次,定容至刻度。 法式弧线 区分编号,按下表插足各试剂。 试剂 0 200ug/ml 葡萄糖法式溶液(ml) 蒸馏水(ml) 蒽酮试剂(ml) 葡萄糖量(ug) 0 1.0 5.0 0 1 0.2 0.8 5.0 20 2 0.4 0.6 5.0 40 管号 3 0.6 0.4 5.0 60 4 0.8 0.2 5.0 80 5 1.0 0 5.0 100 将各管火速摇动混匀后,正在开水浴中煮 10 min,取出冷却,正在 620nm 波长造法式弧线。 样品测定:取待测样品提取液 1.0ml 加蒽酮试剂 5ml ,同以上操作显色测定光密度。 反复 3 次。 结果估计打算: 可溶性糖含量(%)=从法式弧线查得糖的量(μ g)×提取液体积(ml)×稀释倍数/ 【测定用样品液的体积(ml)×样品重量(g)×106】×100 2.2 植物体内可溶性卵白含量的测定 2.2.1 资料 别致的白菜、芹菜、菠菜叶片(剪碎后各取 0.5—1.0g) 2.2.2 试剂 法式卵白质溶液:用牛血皎洁卵白配成含卵白质 100μ g/的法式卵白溶液; 90%乙醇;85%磷酸(W/V);考马斯亮蓝 G-250 溶液 2.2.3 仪器设置 分光光度计;量筒;研钵;烧杯;量瓶;移液管;具塞刻度试管;领会天平;恒温水 浴; 2.2.4 测定手段 0~100μ g/ml 法式弧线的创造:取六支试管,区分按下表数据配造 0~100μ g/ml 血清 白卵白液 1ml。切实接收所配各管溶液 0.1ml,区分放入 10ml 具塞试管中,插足 5ml 考马斯 亮蓝 G—250 试剂,盖塞,反转混淆数次,睡觉 2min 后,正在 595nm 下比色,绘造法式弧线 μ g/ml 牛血清 卵白量(ml) 蒸馏水量(ml) 卵白质含量 g) (μ 1 0 1.0 0 2 0.2 0.8 20 3 0.4 0.6 40 4 0.6 0.4 60 5 0.8 0.2 80 6 1.0 0 100 样品提取液中卵白质浓度的测定:接收样品提取液 1.0ml,放入具塞试管中(每个样品 树立两个反复),插足 5Ml 考马斯亮蓝 G-250 溶液,充塞混淆,睡觉 2min 后正在 595nm 下 比色,记实吸光值,并通过法式弧线查得卵白质含量。 结果估计打算: 样品卵白质含量(mg/g 鲜重)=(C*V/a)/W 式中 C-查法式弧线所得每管卵白质含量(mg) ; V-提取液总体积(ml) ; a-测定所取提取液体积(ml) ; W-取样量(g) 。 3 结果领会 3.1 植物体内可溶性糖含量的测定 3.1.1 可溶性糖法式弧线 表一:各试管中法式葡萄糖的吸光值 管号 葡萄糖含量 (ug) 吸光度 0 0 0 1 40 0.195 2 80 0.370 3 120 0.518 4 160 0.690 5 200 0.706 3.1.2 芹菜、白菜、菠菜中可溶性糖的吸光值 吸光值 芹菜 A1 A2 A3 均匀值 0.358 0.361 0.367 0.362 白菜 0.347 0.352 0.351 0.350 样品名称 菠菜 0.333 0.327 0.327 0.329 比照法式弧线g 蔬菜样品中移取的 1ml 样品溶液中,芹菜样品溶液含 糖量为 80.930μg;白菜样品溶液的含糖量为 78.139μg;菠菜样品溶液的含糖量为 73.256μg。 3.1.3 可溶性糖含量估计打算 样品含糖量=样品含量(ug)*稀释倍数*100/{样品重(g)*10 }g/100g 鲜重 样品 芹菜 白菜 菠菜 质料/g 1.00 1.00 1.00 吸光值 0.362 0.350 0.329 查表所得含 糖量/μg 80.830 78.139 73.256 稀释倍数 100 100 100 可溶性糖含量 /μg 0.8083 0.7813 0.7325 6 由表可知:芹菜中可溶性糖含量最高,白菜中含量居中,菠菜中可溶性糖含量最低。 3.2 植物体内可溶性卵白含量测定 3.2.1 可溶性卵白法式弧线 各试管中法式卵白质的吸光值 管号 卵白质含量 (ug) 吸光度 0 0 0 1 20 0.286 2 40 0.578 3 60 0.852 4 80 0.921 5 100 1.250 3.2.2 芹菜、白菜、菠菜中可溶性卵白的吸光值 吸光值 A1 A2 A3 均匀值 样品名称 芹菜 0.095 0.102 0.097 0.098 白菜 0.122 0.125 0.128 0.125 菠菜 0.085 0.081 0.080 0.082 照法式弧线g 蔬菜样品中移取的 1ml 样品溶液中,芹菜样品溶液含蛋 白量为 4.619μg; 白菜样品溶液的含卵白量为 6.761μg; 菠菜样品溶液的含卵白量为 3.349μg。 3.2.3 可溶性卵白估计打算 样品中卵白质含量 ? C——查法式弧线值, ug VT——提取液总体积, ml Vs——测样时加样量,ml WF——样品鲜重,g 样品 芹菜 白菜 菠菜 卵白质含量 C(ug) 4.619 6.761 3.349 C *VT (mg / g) V *W *1000 S F 提取液总体 积 VT(ml) 5.0 5.0 50. 测样时加样 量 Vs(ml) 1.0 1.0 1.0 样品鲜重 WF(g) 1.0 1.0 1.0 样品中卵白 质 含 量 (mg/g) 0.023 0.034 0.016 由表可知:白菜中可溶性糖含量最高,芹菜中含量居中,菠菜中可溶性糖含量最低。 4 筹议 通过试验对芹菜、白菜和菠菜体内的可溶性糖和可溶性卵白的含量举行了测定